
2018年度國(guó)家自然科學(xué)獎(jiǎng)二等獎(jiǎng)和科技進(jìn)步獎(jiǎng)二等獎(jiǎng)獲獎(jiǎng)團(tuán)隊(duì)部分成員

2018年度國(guó)家科技進(jìn)步獎(jiǎng)二等獎(jiǎng)獲獎(jiǎng)團(tuán)隊(duì)顧興芳(右三)等

黃瓜的馴化歷程

中農(nóng)26號(hào)(蔬菜所供圖)
1月8日是2018年度國(guó)家科技獎(jiǎng)勵(lì)大會(huì)召開(kāi)的日子。
清晨,黃三文和顧興芳在進(jìn)入人民大會(huì)堂參加大會(huì)之前合了一張影,成為他們科研友誼的見(jiàn)證。
他們同來(lái)自中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜花卉研究所(以下簡(jiǎn)稱蔬菜所),同樣研究黃瓜,在同一年分別獲得國(guó)家自然科學(xué)獎(jiǎng)二等獎(jiǎng)和國(guó)家科技進(jìn)步獎(jiǎng)二等獎(jiǎng)。
他們各自帶領(lǐng)團(tuán)隊(duì),又在科研上開(kāi)展合作,搞清楚了黃瓜基因組的“內(nèi)核”,并借此指導(dǎo)黃瓜分子育種,創(chuàng)造了可觀的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì)效益。
十余年來(lái),從基因組到新品種,黃瓜科研真正實(shí)現(xiàn)了“頂天”又“立地”。
為了讓黃瓜有黃瓜味兒
“黃瓜沒(méi)有黃瓜味啦!”“西紅柿的味道越來(lái)越淡了。”蔬菜品質(zhì)已經(jīng)成為老百姓關(guān)心的話題,也是我國(guó)蔬菜科研工作者努力的方向。
但是在黃瓜基因組破譯之前,蔬菜基因組到底什么樣,沒(méi)有人知道。“基礎(chǔ)研究較為薄弱,導(dǎo)致蔬菜優(yōu)良品種培育進(jìn)程緩慢,分子育種無(wú)從開(kāi)展。”黃三文告訴《中國(guó)科學(xué)報(bào)》。
黃瓜是葫蘆科作物的模式物種,它僅有3億個(gè)堿基對(duì),是蔬菜中最少的。同時(shí),在生產(chǎn)上,黃瓜是五大蔬菜之一,又是第一設(shè)施蔬菜。
然而,世紀(jì)之初,我國(guó)黃瓜單產(chǎn)水平和荷蘭等發(fā)達(dá)國(guó)家相比仍有較大差距,一些黃瓜品種在不利生長(zhǎng)條件下易發(fā)苦而嚴(yán)重影響商品價(jià)值。此外,消費(fèi)者對(duì)外觀和風(fēng)味品質(zhì)以及品種多樣性要求越來(lái)越高。
“要解決黃瓜生產(chǎn)中的主要問(wèn)題,亟須創(chuàng)新黃瓜育種的理論和技術(shù)體系。”黃三文說(shuō)。
但是,國(guó)內(nèi)外黃瓜遺傳育種研究一直落后于番茄、白菜等主要蔬菜作物。在黃三文和顧興芳等人提出對(duì)黃瓜開(kāi)展聯(lián)合研究之前,黃瓜一直沒(méi)有完整的分子標(biāo)記遺傳圖譜,最好的遺傳圖譜只有200 多個(gè)分子標(biāo)記,大部分是AFLP 等不可移植的標(biāo)記,且連鎖群的個(gè)數(shù)大于染色體數(shù)目,不能有效地覆蓋到全基因組,這嚴(yán)重限制了黃瓜遺傳育種研究。
“制約黃瓜遺傳育種研究的結(jié)構(gòu)性障礙是其遺傳背景非常狹窄。”顧興芳告訴《中國(guó)科學(xué)報(bào)》,黃瓜是甜瓜屬的66 個(gè)物種中唯一單倍體染色體數(shù)目為7 的物種(其它均為12),基本上無(wú)法通過(guò)有性雜交與同屬的其它物種進(jìn)行遺傳物質(zhì)的交流。
由于遺傳背景狹窄,通過(guò)常規(guī)的技術(shù)手段開(kāi)發(fā)黃瓜標(biāo)記非常困難,造成黃瓜遺傳研究體系落后,這嚴(yán)重制約了黃瓜生物學(xué)研究和分子設(shè)計(jì)育種開(kāi)展。
2005年至2006年,“454”和“Illumina”等新一代基因測(cè)序技術(shù)先后問(wèn)世,使得以前因?yàn)樾实?、耗時(shí)長(zhǎng)、成本高而讓人望而生畏的生物基因組測(cè)序發(fā)生了根本性的變化,低成本、高效率進(jìn)行生物基因組測(cè)序成為了可能。
2006年底,包括黃三文、謝丙炎、顧興芳等在內(nèi)的蔬菜所專家提出利用新一代測(cè)序技術(shù)進(jìn)行黃瓜基因組測(cè)序的建議。蔬菜所時(shí)任所長(zhǎng)杜永臣成先后多次組織召開(kāi)黨委會(huì)和所學(xué)術(shù)委員會(huì)進(jìn)行專題研究。
最后決定,為打破黃瓜分子遺傳研究落后的局面,提升黃瓜分子育種研究水平,并帶動(dòng)我國(guó)其他蔬菜乃至園藝作物的分子育種技術(shù)發(fā)展,蔬菜所自籌千萬(wàn)余元資金,利用新的測(cè)序技術(shù)進(jìn)行黃瓜基因組測(cè)序。
測(cè)序工作2007年正式啟動(dòng)后,又得到了原農(nóng)業(yè)部、科技部和國(guó)家自然科學(xué)基金委員會(huì)的部分項(xiàng)目支持。
解讀基因組秘密
“我們的工作相互支撐。”黃三文團(tuán)隊(duì)研究員張忠華告訴《中國(guó)科學(xué)報(bào)》,從項(xiàng)目啟動(dòng)伊始,兩個(gè)團(tuán)隊(duì)的工作就緊密的聯(lián)系在一起。
以黃三文團(tuán)隊(duì)為主,蔬菜所研究人員抓住新一代基因組測(cè)序技術(shù)出現(xiàn)的契機(jī),破解了第一個(gè)蔬菜作物——黃瓜的基因組遺傳密碼。并以此為基礎(chǔ),研究了世界上主要黃瓜資源的全基因組遺傳變異。
他們證實(shí),黃瓜原產(chǎn)于印度,經(jīng)過(guò)人類馴化選擇成為人們喜歡的蔬菜,后來(lái)傳播到不同地域,形成了三個(gè)主要類型:歐亞黃瓜、東亞黃瓜、西雙版納黃瓜。東亞黃瓜與印度黃瓜的分離時(shí)間是2000多年,與張騫出使西域給中國(guó)帶來(lái)這個(gè)大眾蔬菜的史實(shí)相吻合。
2009年到2013年,上述研究成果先后發(fā)表于《自然-遺傳》和《美國(guó)科學(xué)院院刊》等國(guó)際頂級(jí)期刊上。
顧興芳說(shuō),這些成果為發(fā)現(xiàn)黃瓜重要農(nóng)藝性狀控制基因提供了重要的資源和信息,也為黃瓜種質(zhì)資源的育種利用提供了理論框架。以此為基礎(chǔ),他們克隆和定位了50多個(gè)黃瓜農(nóng)藝性狀基因,推動(dòng)黃瓜育種進(jìn)入分子設(shè)計(jì)時(shí)代。
針對(duì)黃瓜單產(chǎn)較低和華南類型黃瓜偶有苦味的生產(chǎn)問(wèn)題,2014年,他們?cè)凇犊茖W(xué)》雜志上宣布發(fā)現(xiàn)控制果實(shí)數(shù)目和苦味形成的關(guān)鍵基因。
黃三文介紹,黃瓜只有雌花才能發(fā)育成商品瓜,他們發(fā)現(xiàn)M基因能夠控制雌花的形成,M基因是黃瓜首個(gè)得到功能確證的重要農(nóng)藝性狀基因,結(jié)合該基因作用途徑開(kāi)發(fā)了提高雌花率的基因標(biāo)記,用于輔助選育高產(chǎn)黃瓜。
此外,黃瓜中的合成葫蘆素C導(dǎo)致果實(shí)變苦,他們發(fā)現(xiàn)了控制黃瓜苦味物質(zhì)合成的9個(gè)基因,并發(fā)現(xiàn)有兩個(gè)“開(kāi)關(guān)”基因分別在葉片和果實(shí)中控制苦味物質(zhì)的合成。
“把果實(shí)‘開(kāi)關(guān)’關(guān)上,不讓黃瓜變苦;把葉片‘開(kāi)關(guān)’打開(kāi),讓葉片苦來(lái)抗蟲(chóng)。”黃三文說(shuō),苦味物質(zhì)精確調(diào)控是植物中首次揭示代謝產(chǎn)物的精確調(diào)控機(jī)制。
與此同時(shí),顧興芳團(tuán)隊(duì)利用黃瓜基因組大數(shù)據(jù),構(gòu)建了國(guó)際上第一張超飽和含有10629個(gè)SNP的遺傳圖譜;首次發(fā)現(xiàn)了果實(shí)苦味基因Bi-3和顯性果皮有光澤基因G,闡明了有光澤、抗黑星病、抗病毒病等性狀的遺傳規(guī)律;開(kāi)發(fā)出與無(wú)苦味、有光澤、抗黑星病、抗病毒病等21個(gè)性狀緊密連鎖的分子標(biāo)記。
不僅如此,黃瓜基因組研究方法體系在白菜、西瓜和番茄等蔬菜作物基因組研究中得到廣泛應(yīng)用。在我國(guó)多個(gè)單位的同心協(xié)力下,在Nature、Science和Cell等國(guó)際頂尖期刊發(fā)表10多篇研究論文,帶動(dòng)我國(guó)蔬菜基因組學(xué)科進(jìn)入國(guó)際領(lǐng)先行列。
分子育種進(jìn)入“掘金時(shí)代”
長(zhǎng)期以來(lái),我國(guó)蔬菜生產(chǎn)上品質(zhì)優(yōu)良、多抗和豐產(chǎn)性好的黃瓜品種數(shù)量不足。
顧興芳介紹,黃瓜原有主栽品種瓜把長(zhǎng)、瓜色暗、瓜條表面有黃線、果肉顏色發(fā)白、口感差,影響了果實(shí)外觀品質(zhì)和食用品質(zhì);多抗、高抗品種少,造成不同年份的豐產(chǎn)性不穩(wěn)定。
關(guān)于黃瓜主要病害抗病性鑒定方法,更是沒(méi)有形成統(tǒng)一標(biāo)準(zhǔn),影響了抗病性鑒定結(jié)果的準(zhǔn)確性及可比性,導(dǎo)致育種效率降低。
此外,在品質(zhì)和抗病育種技術(shù)上,仍沿用常規(guī)育種手段,無(wú)簡(jiǎn)便且實(shí)用的分子標(biāo)記可用,育種周期長(zhǎng),選擇效率低,導(dǎo)致品種更新?lián)Q代速度慢。
“基因組研究推動(dòng)了黃瓜基因的‘掘金時(shí)代’。”黃三文如是說(shuō)。自然獎(jiǎng)獲得者之一、湖南蔬菜研究所的陳惠明研究員基于基因組研究結(jié)果,培育了“蔬研”系列等新品種,成功解決了華南黃瓜品種變苦而喪失商品價(jià)值的生產(chǎn)難題。累計(jì)推廣約100萬(wàn)畝,創(chuàng)造約80億元的經(jīng)濟(jì)價(jià)值,取得了顯著的社會(huì)效益。
此外,以顧興芳團(tuán)隊(duì)為主,取得了幾項(xiàng)重大原創(chuàng)性成果。
顧興芳團(tuán)隊(duì)研究員張圣平告訴《中國(guó)科學(xué)報(bào)》,他們花十幾年時(shí)間收集保存并系統(tǒng)評(píng)價(jià)了5637份種質(zhì),極大豐富了我國(guó)蔬菜種質(zhì)資源庫(kù)。
通過(guò)創(chuàng)建8項(xiàng)先進(jìn)高效的抗病性鑒定和品質(zhì)評(píng)價(jià)技術(shù),團(tuán)隊(duì)發(fā)掘出抗病優(yōu)質(zhì)資源19份,研制出黑星病、病毒病等8種主要病害的抗病鑒定技術(shù)和瓜把長(zhǎng)度、黃色條紋等品質(zhì)評(píng)價(jià)技術(shù),頒布行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)10項(xiàng),為優(yōu)異基因挖掘和優(yōu)質(zhì)多抗育種提供了種質(zhì)基礎(chǔ)。
顧興芳還帶領(lǐng)團(tuán)隊(duì)率先創(chuàng)制出聚合無(wú)苦味、有光澤等5-6個(gè)優(yōu)質(zhì)基因和抗黑星病、病毒病等5-10個(gè)抗病基因的高配合力自交系12個(gè),攻克了優(yōu)質(zhì)和抗病基因難以聚合的技術(shù)難題。“突破了密刺型黃瓜不抗黑星病、水果型黃瓜不抗病毒病的育種瓶頸。”顧興芳說(shuō)。
利用創(chuàng)制的優(yōu)質(zhì)多抗自交系,他們通過(guò)分子育種手段,培育出新一代優(yōu)質(zhì)多抗新品種8個(gè),實(shí)現(xiàn)了密刺型黃瓜優(yōu)質(zhì)多抗育種的突破。中農(nóng)16號(hào)、中農(nóng)26號(hào)等,占遼寧、河北等設(shè)施黃瓜主產(chǎn)區(qū)總面積的50%以上;中農(nóng)106號(hào)、中農(nóng)18號(hào)等,成為廣東、云南等7省區(qū)的主栽品種,占主產(chǎn)區(qū)的30%以上。
上述新品種在全國(guó)27個(gè)?。ㄊ?、區(qū))累計(jì)推廣1187.9萬(wàn)畝,新增社會(huì)經(jīng)濟(jì)效益91.61億元,其中近三年推廣493.52萬(wàn)畝,新增社會(huì)經(jīng)濟(jì)效益36.97億元。
“新品種的大面積推廣,不僅為農(nóng)民脫貧致富做出了積極貢獻(xiàn);由于其多抗性質(zhì),減少農(nóng)藥使用量20%以上,推動(dòng)了蔬菜產(chǎn)業(yè)綠色發(fā)展,生態(tài)效益顯著。”張圣平說(shuō)。
更重要的是,顧興芳認(rèn)為,這些成果推動(dòng)了行業(yè)科技進(jìn)步:分子標(biāo)記多基因聚合育種技術(shù)的應(yīng)用,實(shí)現(xiàn)了黃瓜常規(guī)育種與分子育種相結(jié)合的重大變革;育成新品種的推廣應(yīng)用,為我國(guó)黃瓜品種占本國(guó)市場(chǎng)主導(dǎo)地位做出了重要貢獻(xiàn)。